背景
香港政府於1998年，與迪士尼商討，於香港興建迪士尼樂園，選址為竹篙灣，並於1999年通過此計劃並商討興建細節。香港政府於2000年宣佈興建香港迪士尼樂園，包括樂園及酒店等等的度假區，於2003年動土興建，最終於2005年9月12日正式啟用。
為方便乘客前往迪士尼樂園，運輸署於2005年2月23日公佈該區交通安排，會開辦六條新線，當中包括由屯門站開出的D33線，由龍運巴士營運，並於同年6月22日更改最終路線編號為R33，只於樂園開放前，以及關閉後短時間內提供服務。
路線開辦
配合迪士尼樂園的收費區域開始試營運，園方會邀請不同團體試玩及進行測試，以及迪欣湖啟用，包括R33線在內的迪士尼專線，於2005年8月16日開始營運。當時九鐵也在屯門西鐵站範圍內張貼前往R33線車站的指示，方便乘客前往轉車。
R33線由屯門站開出後，途經屯門鄉事會路、海珠路、海皇路、皇珠路、屯門公路、汀九橋、青嶼幹線及竹篙灣公路前往迪士尼樂園度假區。路線方面，除原有的屯門站公共交通交匯處於2010年3月，搬遷到現在的室內總站，即杯渡路近C出口位置外，其他路線沒有改變。
R33線只於上午樂開園放前，及晚上樂園關閉及煙花匯演結束後短時間內提供服務，全程收費$19.9(於2008及2011年分別調整至$21及$22.3)。最初上午於屯門站，星期一至六開出三班，假日則為七班，由2005年8月16日至10月11日，為應付樂園開放初期的熱潮，每天會以假日班次行走。晚上則由迪士尼樂園，平日提供三班，星期六及假日分別提供四班及五班車。於2005年9月12日，即樂園正式開放的日子，由於開放時間稍遲，故R33線曾於當日特別提供中午前往迪士尼樂園服務。其他時段，乘客可以先乘搭E33線到青馬收費廣場，再轉乘R8線前往，次程可享八達通$1轉乘優惠。
另外，雖然路線由龍運巴士營運，但當時龍運巴士車隊中，已沒有後備資源給R33線，因此R33線和由沙田開出的R42線一樣，最初長時間由九巴代為派車行走，用車車型不變，即使非特低地台車型也會派出行走。此情況一直維持至2010年代中後期，龍運巴士開始陸續自行派車行走。
客量不及預期，多次削減班次
R33線開辦以來，一直有客量不足的情況，導致龍運巴士曾於2006年至2018年期間，多次削減路線班次，最終更完全取消平日班次，改動重點如下:
(1) 由2006年3月12日起，假日由屯門站開出班次，由七班減至四班，再於2007年5月12日再削至三班。
(2) 由2007年5月12日起，星期一至六由屯門站開出，由三班減至兩班，更於2008年10月13日起完全取消上午班次。
(3) 由2016年4月17日起，假日由屯門站開出，由三班減至兩班，同時加設青馬收費廣場站前往迪士尼樂園的$7分段收費，試圖分流原等候R8線的乘客，但不設原R8線所設有的轉乘優惠。假日上午班次於2017年7月9日更進一步削至只有一班。
(4) 由於迪士尼樂園內的城堡改建而暫停每晚的煙花匯演，只設星期六及假日的巡遊匯演，由2018年1月1日起，R33線完全取消星期一至五服務，只保留星期六及假日，夜間巡遊活動完結後20分鐘開出。
不過，如迪士尼樂園範圍內有特別活動，龍運巴士或會特別提供R33線服務。例如2008年11月25日的「聯合國兒童基金慈善跑」活動，於早上舉行，R33線特別增設當日上午8時30分至11月30分，每20至30分鐘在迪士尼樂園開出，前往屯門站服務。
疫情肆虐，多次停駛
2020年1月，COVID-19於香港開始肆虐。政府為了控制疫情，防止擴散，於2020年1月26日起，宣佈關閉部份場所，而有關場所更於同年3月，被香港法例第599F章中列為「表列處所」。此次安排一直至2020年6月19日，期間R33線暫停服務。雖然迪士尼樂園於2020年6月20日曾短暫重開，但取消了夜間巡遊活動，故服務時間改為星期六及假日，樂園關閉後20分鐘開出。
不過，第三及四波疫情，政府再兩度勒令迪士尼樂園關閉，故R33線於2020年7月15日至9月25日，以及2020年12月2日至2021年2月19日期間，再次暫停服務。
屯赤重組，絕地反彈
屯門赤鱲角連接路於2020年12月27日早上啟用，屯門區前往機場的A33、A33X及E33線於2020年12月28日改經該處。這改動即表示屯門區再沒有日間常規路線前往青嶼轉車站，讓乘客在R33線服務時段以外轉乘R8線前往迪士尼樂園。
最初龍運巴士的宣傳單張中，只建議乘客先乘搭57M、58M、59M、60M、61M、66M、67M或68A線，於荃灣利用九巴轉乘龍運A線，次程減收$6的轉乘優惠，轉乘A31線到青嶼轉車站再轉乘R8線前往迪士尼樂園。
2021年5月8日，龍運巴士在屯門區議會的壓力下，最終同意加強R33線服務，並重設平日班次。最初於屯門站，於星期一至五上午6時30分，以及每日上午9時15分及10時40分開出。於迪士尼樂畏，則為每日下午6時30分鐘，以及星期六及假日，樂園關閉後20分鐘開出。
2021年8月，R33線獲進一步加開班次，新增樂園開放日子(星期二及四除非是公眾假期，否則會暫停開放進行清潔工作)，由屯門站開出上午11時15分及下午1時15分班次，以及平日由迪士尼樂園開始下午7時50分班次。
2021年11月1日起，R33線修改開車時間，屯門站為平日上午6時30分，以及樂園開放日子的上午9時15分及10時40分開出，而上午11時15分及下午1時15分班次，則改為只於星期六及假日開出。於聖誕假期期間，很多屯門區居民前往迪士尼樂園遊玩，導致有屯門區的FACEBOOK群組發現，R33線於中途站有不能上車情況，導致乘客不滿。
好景不常，第五波疫情於2022年1月爆發，迪士尼樂園於2022年1月7日起再度關閉。不過，於樂園內仍有需要上班人士，故龍運巴士仍保留平日上午6時30分由屯門站開出，以及下午6時30分由迪士尼樂園開出班次，方便於該處上下班員工。
改經屯赤，降低收費
在2022/2023年年度屯門區路線計劃中，運輸署建議R33線不再途經青嶼幹線，改經屯門-赤鱲角隧道及北大嶼山公路前來往屯門及迪士尼樂園。同時調低票價，由$22.3減至$20，行車時間及車費同時因而降低。
最於此建議於2022年7月18日落實，同時於龍門路沿線加設分站。另外，R33線增設與屯門-赤鱲角隧道的A及E線提供轉乘優惠，方便屯門及元朗區乘客。
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